蒸汽灭菌循环,液体

蒸汽灭菌循环,第2部分:液体

跟随我们的第一篇文章蒸汽灭菌周期’解决重力与真空循环-这第二篇文章讨论液体循环。

几乎每个实验室都必须对某些类型的液体溶液进行消毒,如溶源肉汤(也称为LB肉汤)、培养基、琼脂、缓冲液、盐水和水。因此,在通风容器中灭菌液体需要一种特殊的类型和一个称为液体循环的适当应用。

液体循环

液体依靠液体循环来避免所谓的“沸腾”现象。沸腾是指液体沸腾得太厉害以至于溢出容器顶部。在循环的排气阶段,如果你的高压釜室的压力释放得太快,就会发生沸腾。大量的液体会因为沸腾而丢失,这可能会导致不必要的液体溢出在你的房间底部和随后的清理。

为了防止在排气阶段沸腾,腔室压力必须缓慢释放。这个过程是由消毒器控制的控制系统.控制排气速率可以使液体负荷随着周围腔室压力的降低而冷却下来。

要确保你的高压灭菌器被编程和配备了正确的软件和硬件来处理一个缓慢的排气液体循环。通常,会提供导管架排污选项,以帮助最大限度地减少沸腾。在液体循环过程中,该选项自动将蒸汽从夹套(围绕着腔室)中排出,从而使热量以更快的速度从腔室和液体负载中抽出。液体循环的排气速率不同于标准的重力或真空循环,在这里,室压被快速释放。

注意:重要的是要认识到,较大的液体负载将需要更长的时间来加热和冷却。见下图:

温度设置 液体量(ml) 时间设定(分钟)
250°F(121°C) 75 25
250°F(121°C) 250 30.
250°F(121°C) 500 40
250°F(121°C) 1000 45
250°F(121°C) 1500 50
250°F(121°C) 2000 55

高压釜操作人员应该记住这一点,特别是对于大烧杯或玻璃瓶。例如,一个500mL的烧瓶30分钟的液体循环不一定能达到同样的效果,如果灭菌一个5 L的烧瓶。最好的做法是:a)验证您的液体装载与密封生物指标和B)尽量减少容器体积,以使循环时间保持在可控范围内。

现在你知道什么导致沸腾和如何避免它时,运行一个液体循环在你的高压釜。然而,虽然液体循环防止沸腾,它也可能允许一小部分液体负载蒸发。因此,当灭菌体积很小时,必须尽量减少或消除蒸发。

为了减少蒸发,可能需要更先进的灭菌循环应用。请继续关注我们的蒸汽灭菌循环系列的下一篇文章,在那里我们将讨论Air-Overpressure周期

要了解蒸汽灭菌的概况,请查看我们的视频:

什么导致液体沸腾?

让我们从煮一壶水开始。在海平面,水的沸点为212华氏度(100˚C)。然而,在海拔5280英尺的丹佛,水的沸点是203华氏度(95华氏度)。但是为什么沸点会有不同呢?答案在于海拔高度,以及将水“向下”推的大气压力。在海平面上,大气压力只有14.6 psia(相当于0 psig或0压力表压力),而丹佛的大气压力只有12.1 psia。压力和温度之间的关系决定了水的沸点;不仅仅是温度。

现在,让我们考虑一下高压灭菌器内部的条件。在灭菌过程中,液体负载加热到250˚F(121˚C)的温度。只有当液体负荷承受蒸汽压力时,才能达到这个温度。在灭菌阶段,高压釜室通常在高于大气压15 psia的压力下工作(大约29.6 psia)。这个额外的压力刚好足够保持液体负载不沸腾。灭菌循环完成后,腔室必须排出蒸汽,这意味着腔室的温度和压力会降低。为了防止沸腾,腔室压力必须缓慢降低,以使负荷温度保持在沸点以下。如果压力突然耗尽,负载的温度将超过其沸点,导致瞬间剧烈的沸腾。

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